Bài viết được tham vấn trình độ cùng Thạc sĩ, bác bỏ sĩ nai lưng Thị Vượng - bác bỏ sĩ Xét nghiệm vi sinh - Khoa Xét nghiệm - cơ sở y tế Đa khoa thế giới Vinmec Hải Phòng.
Bạn đang xem: Biện luận kết quả nhuộm gram
Thực tế gồm nhiều phương pháp để xác định một số loại vi khuẩn, trong đó nhuộm gram là cách thức được trí tuệ sáng tạo năm 1884 với vẫn có giá trị cho đến ngày nay nhằm phân loại vi trùng nhanh thành 2 nhóm khủng với tính năng riêng biệt.
Nhuộm gram là phương thức dựa trên công dụng lý hóa của thành tế bào nhưng mà phân loại vi trùng thành 2 nhiều loại là vi khuẩn gram âm và vi khuẩn gram dương. Nhuộm gram hoàn toàn có thể được thực hiện trên cả dịch khung hình hoặc trên mẫu sinh thiết bị nghi vấn nhiễm khuẩn.
Nhuộm gram là phương pháp xác định loại vi khuẩn nhanh rộng nuôi ghép có chân thành và ý nghĩa giúp minh bạch sớm các bệnh vì chưng nhiễm khuẩn nhằm xác kim chỉ nan điều trị cũng giống như tiên lượng bệnh. Các thuốc thử cần thực hiện cho cách thức này gồm có:
Dung dịch tím GentianDung dịch Lugol
Tẩy đụng Acetone hỗn hợp đỏ Fuchsin
Quy trình nhuộm gram sẽ gồm các bước sau:
Dàn đều dịch phẩm hoặc vi khuẩn lên lam kính sạch;Cố định mẫu căn bệnh phẩm bằng cách hơ bên trên ngọn lửa đèn động và nhằm nguội;Các bước nhuộm:Đầu tiên đậy dung dịch tím Gentian với để khoảng 30 giây tiếp nối rửa bên dưới vòi nước chảy nhẹ. Bước này để giúp nhuộm toàn bộ vi khuẩn thành color tímTiếp theo đậy dung dịch Lugol để cố định màu, cũng để khoảng 30 giây rồi rửa dưới vòi nước. Dung dịch để giúp gắn màu sắc tím vào vi khuẩn đậm tốt nhạt tùy ở trong vào các loại của nó
Tẩy màu bằng cồn acetone để khoảng chừng 30 giây và rửa nước. Đây là cách rất đặc biệt quan trọng để phân biệt loại vi trùng đã được hỗn hợp Lugol gắn chắn chắn màu tím vào và nhiều loại màu tím bị tẩy trôi
Cuối cùng đậy dung dịch đỏ Fuchsin để khoảng 30 giây rồi rửa bên dưới vòi nước sẽ làm những vi khuẩn đã được tẩy không còn màu tím bắt lại màu sắc đỏ, các vi khuẩn đã biết thành nhuộm tím sẽ không bị ảnh hưởng.Để thô tự nhiên
Soi dưới trang bị kính dầu
Vi khuẩn có điểm lưu ý là lớp peptidoglycan dày sinh sống thành tế bào giúp giữ các phức tạp tím tinh thể nên sau khi nhuộm gram sẽ bắt color tím sẫm Gentian và không biến thành tẩy color sau cần sử dụng cồn tẩy 950. Những vi trùng này sẽ tiến hành phân loại là vi trùng gram dương như: tụ cầu, phế cầu, liên cầu,...
Vi khuẩn gồm lớp peptidoglycan mỏng tanh hơn và bao gồm thêm lớp màng lipopolysaccharide bên ngoài không thể giữ lại lại phức tạp tím tinh thể-iod và sẽ ảnh hưởng khử màu. Kế tiếp khi cần sử dụng dung dịch Fuchsin che lên thì các vi trùng này đang bắt red color hoặc hồng. Những vi trùng này sẽ tiến hành phân nhiều loại là vi khuẩn gram âm.
Như vậy hoàn toàn có thể thấy cách tẩy màu sắc rất đặc trưng và rất cần phải có năng lực nhất định vì tài năng bắt màu của Gram dương chưa phải là giỏi đối.
Vi trùng gram dương trả do các yếu tố sau:
Tiêu bản được thắt chặt và cố định khi chưa khô hoặc thừa dàyMàu của cặn dung dịch nhuộm gây lệch lạc kết quả
Lugol không được đổ không còn để cố định và thắt chặt màu
Cổn tẩy không đủ thời gian để phân biệt chính xác
Dung dịch Fuchsin thừa đậm hoặc nhuộm thừa lâu
Vi khuẩn gram âm giả vì các tại sao như không chũm Lugol hoặc tẩy hễ quá lâu và không tráng kỹ.
Để đặt lịch đi khám tại viện, người tiêu dùng vui lòng bấm sốHOTLINEhoặc để lịch thẳng TẠI ĐÂY.Tải cùng đặt định kỳ khám tự động hóa trên vận dụng My
Vinmec để quản lý, theo dõi và quan sát lịch với đặt hẹn phần đông lúc đa số nơi tức thì trên ứng dụng.
Bài viết này được viết cho những người đọc tại sử dụng Gòn, Hà Nội, hồ Chí Minh, Phú Quốc, Nha Trang, Hạ Long, Hải Phòng, Đà Nẵng.
có rất nhiều loại vi trùng gây bệnh dịch cho cơ thể, tuy nhiên các triệu chứng của các bệnh bởi vì vi khuẩn tạo ra đều gần như là giống nhau. Để riêng biệt được dịch do vi trùng nào gây ra thì phương thức nuôi cấy và định danh vi khuẩn là cách thức giúp chẩn đoán đúng chuẩn vi khuẩn khiến bệnh. Và trước khi thực hiện nuôi cấy thì nhuộm soi vi trùng là kỹ thuật thứ nhất phải làm để sở hữu định hướng đầu tiên về một số loại vi khuẩn.
1. Nhuộm soi vi khuẩn để làm gì?
Thực hiện kỹ thuật nhuộm soi vi trùng với mục đích review sơ cỗ về hình ảnh, đặc điểm bắt màu, cách sắp xếp của vi trùng và sắc thái tế bào từ bệnh phẩm. Từ kia có kim chỉ nan sơ cỗ về vi khuẩn để chọn phương pháp tiếp theo nhằm định danh vi khuẩn gây bệnh.
2. Nguyên lý của cách thức nhuộm soi vi khuẩn
Tùy theo triệu hội chứng của bệnh nhân rất có thể mắc loại vi trùng nào mà chưng sĩ vẫn lựa chọn cách thức nhuộm mê thích hợp, cũng chính vì các loại vi trùng có tính chất bắt color với những thuốc nhuộm khác biệt là không giống nhau.
Có nhiều phương pháp nhuộm như: nhuộm Gram, nhuộm xanh methylen, nhuộm Ziehl - Neelsen, nhuộm thấm bạc,... Bao gồm 3 cách thức nhuộm thường được sử dụng nhiều duy nhất là:
Nhuộm Gram: cách thức này dựa trên sự khác nhau về cấu tạo vách tế bào vi trùng Gram âm cùng Gram dương. Trong quy trình nhuộm, vi khuẩn Gram dương vẫn giữ được màu tím của dung dịch nhuộm tím gentian, còn vi khuẩn Gram âm không giữ có màu sắc tím của gentian và sẽ bắt color hồng fuchsin. Lúc soi trên kính hiển vi với đồ gia dụng kính to giúp nhận định về hình dáng và đặc thù bắt màu của vi khuẩn.
Hình 1: mẫu tiêu bản nhuộm Gram
Nhuộm xanh methylen: thuốc nhuộm xanh Methylen là dung dịch nhuộm cation có điện tích dương, màng tế bào của vi trùng mang điện tích âm. Vì chưng vậy khi đến thuốc nhuộm gây ra hiện tượng bắt màu do sự kết hợp của hai loại điện tích trái dấu.
Đây là phương pháp nhuộm dễ dàng để quan sát ngoài mặt của tế bào, vi khuẩn, được thực hiện trong làm phản ứng phình vỏ, định danh Corynebacterium diphtheriae.
Nhuộm Ziehl - Neelsen: phương thức nhuộm Ziehl - Neelsen sử dụng 2 hoá chất nhuộm màu là carbol fuchsin với xanh methylen kết hợp với chất tẩy color (hỗn thích hợp acid-alcohol) để phát hiện những trực khuẩn kháng cồn kháng acid (thường chạm mặt là Mycobacteria hay có cách gọi khác là trực khuẩn lao).
Vách tế bào các Mycobacteria gồm một lượng phệ acid mycolic nên khi sử dụng cách thức nhuộm Gram truyền thống lâu đời nên những vi trùng này rất khó bắt màu. Bởi vì đó, yêu cầu sử dụng phương thức nhuộm phòng cồn chống acid để quan sát những vi trùng này.
Hình 2: chủng loại tiêu phiên bản nhuộm Ziehl - Neelsen
3. Các bước thực hiện các bước nhuộm soi vi khuẩn
3.1. Lấy căn bệnh phẩm
Bệnh phẩm được mang tại các vị trí nghi hoặc nhiễm khuẩn của cơ thể. Vì thế mỗi loại bệnh phẩm không giống nhau có các cách thức lấy khác nhau.
Lấy bệnh phẩm đúng chuẩn là yếu tố rất đặc trưng để xác định khung hình có bị nhiễm vi trùng hay không. Nếu đem sai dịch phẩm (sai vị trí, lấy bệnh dịch phẩm không quánh hiệu,...) thì công việc tiếp theo đều không có tác dụng.
Nguyên tắc lấy dịch phẩm trong các xét nghiệm vi trùng là:
Đúng chỗ: Chọn đầy đủ vị trí đặc hiệu độc nhất nghi ngờ có không ít vi trùng nhất.
Nguyên tắc đặc trưng nhất đó là vô khuẩn vì vi trùng tồn tại khắp nơi không tính môi trường, trường hợp như quá trình lấy chủng loại không đáp ứng vô trùng thì khi triển khai xét nghiệm hoàn toàn có thể sẽ cho công dụng nhầm loại vi trùng nhiễm từ bỏ môi trường.
Xem thêm: Tức Cảnh Pác Bó Phân Tích - Phân Tích Bài Thơ Tức Cảnh Pác Bó Của Hồ Chí Minh
Vi khuẩn thường có đời sống cực kỳ ngắn ngoài môi trường vì vậy sau khi lấy mẫu hoàn thành phải gửi ngay về chống xét nghiệm để tiến hành nhuộm soi. Trường hợp trong đk không gửi được tức thì về chống xét nghiệm thì phải bảo quản ở môi trường xung quanh và nhiệt độ thích hợp.
3.2. Công việc tiến hành
Phòng xét nghiệm vi sinh sau khi mừng đón bệnh phẩm sẽ so sánh thông tin trên mẫu bệnh phẩm cùng giấy xét nghiệm tiếp đến sẽ triển khai làm tiêu phiên bản nhuộm soi tương xứng với từng loại bệnh dịch phẩm.
Tùy theo sự nghi hoặc của bác sĩ cùng với từng loại vi trùng cần xác định để triển khai chọn cách thức nhuộm với thuốc nhuộm đam mê hợp.
Tiến hành các bước nhuộm tiêu bản theo quy trình chuẩn chỉnh của phương pháp nhuộm đó.
Sau lúc nhuộm xong, để tiêu bản khô thoải mái và tự nhiên hoặc ngấm khô bởi giấy thấm rồi thực hiện soi bên trên kính hiển vi quang quẻ học.
Hình 3: Nhuộm tiêu bản
3.3. Trả kết quả xét nghiệm
Quan giáp tiêu bản ở trang bị kính x10, x40 nhằm mục đích mục đích:
Đánh giá bán tiêu phiên bản đã được tẩy màu đúng chưa.
Tùy theo mẫu bệnh dịch phẩm nhưng mà màu nền của tiêu bản có hay là không bắt màu.
Chuyển sang trọng quan cạnh bên ở vật dụng kính dầu x100 quan tiếp giáp hình ảnh tế bào và vi khuẩn.
Hình thể: ước khuẩn, trực khuẩn, xoắn khuẩn, phẩy khuẩn, tuy vậy cầu,...
Kích thước: to/nhỏ, đồng đều/đa hình thái,...
Tính hóa học bắt màu: tùy theo phương pháp nhuộm để đánh giá tính hóa học bắt màu của vi khuẩn: Gram âm (bắt màu đỏ), Gram dương (bắt màu sắc tím), bắt màu xanh da trời (xanh methylen) hay bắt màu hồng (nhuộm ziehl - Neelsen),...
Cách sắp đến xếp: đứng solo lẻ, xếp theo cặp, xếp theo chuỗi, xếp theo đám,...
Xem xét địa điểm của vi trùng ở vào hay ngoài bạch cầu.
Đếm con số và mô ta những loại vi trùng quan ngay cạnh được bên trên tiêu bản.
Hình 4: Tiêu bản có song cầu bắt color Gram âm
Trả kết quả nhuộm soi vi khuẩn:
Âm tính: không tìm thấy vi khuẩn trên tiêu bản nhuộm.
Dương tính: Ghi rõ những tế bào và con số tế bào quan gần cạnh được trong ít nhất 20 vi trường
Đối cùng với với vi khuẩn cần nêu rõ hình thái, biện pháp sắp xếp, đặc điểm bắt color và số lượng vi trùng theo tiêu chuẩn chỉnh của chống xét nghiệm.
Đối với xét nghiệm nhuộm soi vi trùng thì việc lấy đúng bệnh dịch phẩm đặc trưng nhưng vấn đề làm tiêu bạn dạng nhuộm cũng đặc trưng không kém. Tiêu bản yêu mong phải gồm độ dày vừa phải, không tồn tại cặn thuốc nhuộm ví như không rất có thể sẽ bị nhầm lẫn vi khuẩn với cặn dung dịch nhuộm.
Xét nghiệm nhuộm soi vi khuẩn rất cần được được thực hiện trong môi trường thiên nhiên vô trùng tuyệt vời vì vậy bài toán chọn đơn vị chức năng để thực hiện phương thức này là 1 điều cực kì quan trọng.
Bệnh viện Đa khoa thamluan.com với trung trọng điểm xét nghiệm được đầu tư trang thứ hiện đại chuẩn quốc tế đang được cỗ y tế công nhận đủ đk tiến hành phương thức nhuộm soi vi khuẩn là 1 trong đơn vị các bạn nên tin yêu lựa chọn.
Gọi đến tổng đài 1900 56 56 56 để được tư vấn về những dịch vụ xét nghiệm và nhiều phầm mềm khác.
